Ein Einblick in das Oligo-Projekt

Was ist Oligo?

Die Expression des genetischen Materials verläuft von der DNA über die RNA zu den Proteinen. Im vergangenen Jahrhundert konzentrierten sich die Bemühungen zur Entwicklung neuer Arzneimittel hauptsächlich auf das Targeting von Proteinen mithilfe verschiedener Wirkstoffklassen, darunter kleine Moleküle und monoklonale Antikörper. Dabei beeinflusst das Arzneimittel die Funktion eines oder mehrerer spezifischer Proteine. Allerdings lassen sich nicht alle Arten von Proteinen mit dieser Strategie behandeln.

Eine Alternative zu diesem klassischen Ansatz ist die Modulation der DNA oder RNA. Dies kann mithilfe von Oligonukleotiden erreicht werden. Oligonukleotide sind ein- oder doppelsträngige, kleine synthetische Nukleinsäurepolymere (≈20 oder mehr) mit einer bekannten Sequenz. Ist diese Sequenz komplementär zu einem bestimmten Abschnitt der DNA oder RNA – auch als Antisense-Oligonukleotid bezeichnet –, kann sie dort einen Doppelstrang bilden und so die Genexpression hemmen. Auf diese Weise beeinflusst sie die Funktion des Proteins.

Ein solcher Oligonukleotid-Prozess besteht aus folgenden Schritten:

1. Synthese: Hierbei handelt es sich um die chemische Synthese relativ kurzer Nukleinsäurefragmente mit einer definierten chemischen Struktur (Sequenz). Um das gewünschte Oligonukleotid zu erhalten, werden die Bausteine (Amidite) nacheinander an die wachsende Oligonukleotidkette in der für die Sequenz des Produkts erforderlichen Reihenfolge gekoppelt. Diese Synthese findet in einer mit einem Träger gefüllten Säule statt.
2. Spaltung und Entschützung: Nach Fertigstellung der Sequenz wird das Produkt von der festen Phase (= Träger) abgespalten, in eine Lösung überführt, entschützt und gesammelt
3. Reinigung: Diese rohe Oligonukleotidlösung wird anschließend mittels Chromatographie von Verunreinigungen getrennt
4. Ultrafiltration / Diafiltration (UFDF): Dabei werden die Oligonukleotide von Salzen befreit und weiter konzentriert.
5. Annealing: Bei diesem optionalen Schritt kann durch Annealing von einem einzelsträngigen Oligonukleotid zu einem doppelsträngigen übergegangen werden
6. Lyophilisierung: Abschließend wird das überschüssige Wasser durch Gefriertrocknung entfernt, wodurch das Endprodukt gewonnen wird

Ausbau des Oligonukleotid-Kompetenzzentrums

Um selbst Oligonukleotide herstellen zu können, die für toxikologische Chargen oder die klinische „First-in-Human“-Produktion (FIH) geeignet sind, beschloss Janssen Pharmaceutica, sein Oligonukleotide-Kompetenzzentrum zu modernisieren und mit cGMP-konformer Ausrüstung auszustatten. Ziel dieses Zentrums ist es, die internen Kapazitäten und Kompetenzen auszubauen, um eine termingerechte und zuverlässige Lieferung klinischer Produkte sicherzustellen und neue Prozesse zu entwickeln.

Fit For Purpose

Da der Schwerpunkt dieses Prozesses ausschließlich auf FIH-Zwecken liegt, wurde beschlossen, einen „verschlankten“ Qualifizierungsansatz zu verfolgen, den „Fit For Purpose“ (F4P)-Ansatz. Der Schwerpunkt liegt dabei vor allem auf der maximalen Nutzung von FAT-/SAT-/Inbetriebnahme-Tests, dem Verzicht auf eine strikte Trennung der verschiedenen Qualifizierungsphasen sowie weniger Überprüfungen und Genehmigungen durch die Qualitätssicherung. Dies führt zu einem schnelleren Durchlaufen der Qualifizierung und deutlich weniger Papierkram und Dokumenten.

Beitrag von Advipro

Um dieses Großprojekt mit ehrgeizigen Zeitplänen erfolgreich zum Abschluss zu bringen, wurde unter anderem die Unterstützung von Advipro in Anspruch genommen. Dabei hat das A-Team den Compliance-Bereich übernommen, und zwar sowohl für die Ausrüstung, Versorgungsanlagen und Einrichtungen als auch für die Ausführungssysteme (CSV).

Lien – Anlagen

Meine Rolle innerhalb des Projekts konzentrierte sich zunächst auf den Bereich „Ausrüstung“. Eine Vielzahl mobiler Behälter, Reaktoren, Skids usw. musste beschafft, getestet und qualifiziert werden. Ich war verantwortlich für:

1. die Bereitstellung aller Qualifizierungsunterlagen (URS/IA, Protokolle, Berichte usw.). Diese wurden auf der Grundlage des zuvor erläuterten „Fit-for-Purpose“-Ansatzes erstellt. Die größte Herausforderung dabei bestand darin, festzulegen, was im Rahmen des „Fit-for-Purpose“-Ansatzes erforderlich war und was nicht, da dies für alle Mitglieder des Projektteams Neuland war.
2. Die Erstellung des übergreifenden Change-Control-Prozesses und der verschiedenen gerätespezifischen Change-Control-Prozesse. Dies umfasst auch die Koordination sowie die Überprüfung und Bearbeitung aller CC-Maßnahmen (mehr als 1.000 Maßnahmen).

Als „last woman standing“ ist es derzeit meine Aufgabe, den gesamten Compliance-Bereich für das Oligo-Projekt abzuschließen, also sowohl die Geräte als auch die Versorgungs- und Anlagenbereiche sowie die Ausführungssysteme.

Rani – Versorgungsanlagen & Einrichtungen:

Im Rahmen des Projekts habe ich damit begonnen, Lien bei der Erstellung der Qualifizierungsunterlagen auf der Grundlage der „Fit-for-Purpose“-Gerätetests zu unterstützen. Ich nahm an verschiedenen FATs in den Niederlanden für die mobilen Behälter teil, die in den verschiedenen Schritten der Oligonukleotid-Produktion zum Einsatz kommen. Meine Aufgaben dabei waren: die Dokumentation zu prüfen und einige Funktionstests durchzuführen. Nach einer kurzen Zeit der Unterstützung im Bereich „Ausrüstung“ war es notwendig, meinen Fokus vollständig auf den Bereich „Versorgungsanlagen und Einrichtungen“ innerhalb dieses Projekts zu richten, für den eine klassische Qualifizierung durchgeführt werden musste. Ich war verantwortlich für:

1. die Erstellung aller Qualifizierungsdokumente (URS, IA, Qualifizierungs- und Sicherheitsprotokolle, Qualifizierungs- und Sicherheitsberichte usw.) gemäß den beiden unterschiedlichen Methoden der beiden zuständigen Abteilungen bei Janssen Pharmaceutica.
2. Erstellung der für den Bereich „Utilities & Facilities“ spezifischen Change Controls
3. Die Nachverfolgung und Koordination der Einreichung der Nachweise für diese Change-Control-Maßnahmen

Im Rahmen dieses Projekts konnte ich meine Koordinationsfähigkeiten weiterentwickeln, da ich mit verschiedenen Auftragnehmern, den verschiedenen Abteilungen bei J&J usw. kommunizieren musste.

Kristof – Execution Systems

Als Compliance-Ingenieur war ich hauptsächlich mit dem Automatisierungsbereich des Projekts befasst. Dabei habe ich mich mit allen Aspekten rund um Execution-Systeme, SPSen, Datenintegrität usw. vertraut gemacht. Für Oligo wurde speziell PCS7 eingesetzt, das Prozessleitsystem, das unter anderem für die Überwachung, Visualisierung und (in begrenzten Fällen) die direkte Steuerung von Anlagen zuständig ist. PCS7 war an den Change Controls vieler Systeme beteiligt, was die Sache sehr komplex machte. Für PCS7 war eine vollständige Validierung erforderlich. Ich war vom Design-Review bis hin zu den Funktionstests beteiligt. Ich habe mich hauptsächlich mit der Dokumentation befasst, darunter unter anderem die Erstellung eines URS, RA und IOQP. Außerdem durfte ich selbst einige Funktionstests im Zusammenhang mit der Datenintegrität durchführen.

Sara – Projektmanagerin

Während des Oligo-Projekts war ich die erste Mitarbeiterin von Normec Advipro, die in das Projekt einstieg. Ich war an der Erstellung des Projektqualifizierungsplans und der Festlegung des Ansatzes beteiligt, der für die Compliance innerhalb des Projekts verfolgt werden sollte. Nach dem Aufbau des Teams übertrug ich meine Aufgaben systematisch mehr und mehr an das Team. Ich war im Projekt für die übergreifende Planung der Compliance-Aufgaben und das Budget des gesamten Advipro-A-Teams verantwortlich. Seitens Normec Advipro haben wir uns stets flexibel gezeigt, um die Ressourcen bereitzustellen, die das Projekt benötigte. Außerdem habe ich die Arbeitsbelastung des Teams im Auge behalten und bei Bedarf ausgeholfen.

Und wie hat Janssen Pharmaceutica die Zusammenarbeit mit einem Klasse-A-Team erlebt?

„Es herrschte ein echter Teamgeist innerhalb von Normec Advipro und eine schnelle Integration in das Projektteam. Es war ein spannender Prozess, bei dem das Team Ressourcen flexibel einsetzen konnte und für eine termingerechte Lieferung sowie die Nachbetreuung hochwertiger Dokumentation sorgte. Das Projektmanagement lag bei diesem motivierten Team absolut in guten Händen!“

– Jurgen Verbraeken, Senior Principal Engineer